Prilikom rukovanja mikroorganizmima važno je pravilno koristiti aseptičku tehniku-kako biste spriječili da se vaši mikroorganizmi kontaminiraju vanjskim silama, kao i kako biste zaštitili sebe i ljude oko sebe.
Koraci
Korak 1. Zaštitite se
Vežite dugu kosu i nosite laboratorijski ogrtač i zaštitne naočale.
Korak 2. Operite ruke i radni prostor
Operite ruke vodom i sapunom i poprskajte klupu sa 70% etanola.
Korak 3. Postavite svu svoju opremu
Prije početka pobrinite se da imate sve spremno za rad.
Korak 4. Uključite bunsen gorionik što je više moguće
Trebat će vam za sterilizaciju vaše opreme, a propuh prema gore sprječava da vanjski zagađivači padnu na vašu kulturu.
Okrenite ogrlicu tako da je protok zraka potpuno otvoren
Korak 5. Sterilizirajte inokulacijsku petlju
Držite ga pod kutom od približno 45 ° prema dolje i polako ga premještajte kroz plamen tako da zasja vruće crveno-bijelo.
- Najlakše je držati petlju između palca i pokazivača i podržavati je srednjim prstom.
- Najtopliji deo plamena nalazi se tačno na vrhu unutrašnjeg plavog vatrenog konusa.
Korak 6. Drugom rukom zgrabite svoju izvornu kulturu
- Ako se radi o ploči, držite je i otvorite poklopac tek toliko da petlja uđe unutra.
- Ako se radi o cijevi s poklopcem, upotrijebite ružičasti prst ruke s kojom držite petlju za cijepljenje da biste uklonili poklopac, a zatim brzo dvaput povucite otvor cijevi kroz plamen bunsen plamenika. To se naziva plamtenje i ubija sve što želi ući u cijev, a stvara konvekcijsku struju koja tjera zrak iz cijevi tako da ga ništa ne može dobiti. Držite se svog poklonca za poklopac za sljedeći korak.
Korak 7. Inokulirajte
Dodirnite petlju za cijepljenje koloniji koju želite pokupiti. Ako cijepite iz tekuće juhe, umočite petlju cijepljenja u epruvetu i protresite petlju kako biste bili sigurni da ćete dobiti dovoljno bakterija.
Korak 8. Zatvorite izvornu kulturu
Ako je u pitanju tanjir, samo zatvorite poklopac i vratite ga nazad. Ako je riječ o cijevi, dvaput provucite otvor kroz plamen bunsen plamenika, a zatim ponovo postavite poklopac.
Korak 9. Otvorite novu ploču
Kao i do sada, slobodnom rukom otvorite poklopac tek toliko da otvorite petlju
Korak 10. Pokrijte bakterije
Lagano prevucite petlju cijepljenja po površini, pazeći da ne prodre u agar.
Uobičajen obrazac pruganja je metoda kvadranta
Korak 11. Zatvorite ploču
Korak 12. Sterilizirajte inokulacijsku petlju
Kao i prije, držite ga pod kutom od 45 ° prema dolje i polako ga pomičite kroz plamen tako da postane vruće crveno-bijelo.
Savjeti
- Općenito, rukavice nisu potrebne. Svi gore navedeni koraci služe za zaštitu i vas i vaših bakterija, pa je rizik od kontaminacije vrlo nizak. Rukavice mogu izazvati gadne opekotine ako ih slučajno dodirnete vrućom omčom za cijepljenje.
- Imajte na umu da radite s vatrom. Nije velika stvar, samo budite sigurni da znate šta da radite ako se opečete; pauzirajte eksperiment, isperite opekotinu vodom i, ako je potrebno, obavijestite svog nadzornika.
- Ako radite više puta, a da morate koristiti aseptičku tehniku, nije potrebno potpuno isključiti gorionik bunsena između ciklusa - samo ga spustite do upravljačkog plamena i isključite ga do kraja tek kad završite.
